Fight Night Round 2 offre, comme son prédécesseur, une jouabilité innovante grâce au système analogique Contrôle total des poings qui permet aux joueurs de frapper à plusieurs reprises, de bloquer et d'esquiver avec une précision et une maîtrise totales. Avec des coups toujours plus redoutables, les joueurs peuvent désormais dominer le ring avec le tout nouveau Coup fatal qui offre la possibilité de mettre son adversaire KO avec une frappe surpuissante et dévastatrice.
Dans le jeu, chaque frappe compte car elle inflige des blessures dynamiques qui réduisent la capacité des adversaires à se défendre. La gestion du boxeur est également possible en dehors du ring. Grâce à la nouvelle option Soigneur, soigner ses blessures entre les rounds permet de minimiser les dommages durant le combat.